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产物名称：NEB rCutSmart缓冲液(B6004V)现货供应

产物货号：叠6004痴

产物品牌：狈贰叠

产物介绍：

NEB rCutSmart缓冲液(B6004V)适用于各类限制性内切酶，超过 210 种限制性内切酶都能在rCutSmart缓冲液中表现出百分之bai的活性，从而极大地简化了实验过程中双酶切反应的准备工作。rCutSmart 缓冲液中富含重组白蛋白，因此可减少试管数量和移液操作步骤。此外，许多DNA修饰酶也能在rCutSmart缓冲液中保持100% 活性，因此无需进行后续纯化。

此外，New England Biolabs为每种限制性内切酶提供了一种采用颜色标记的10X NEBuffer 反应缓冲液，以确保酶保持最佳（100%）活性。New England Biolabs的大多数酶均配有四种标准NEBuffer 缓冲液之一。这些缓冲液中含有重组白蛋白。

使用方法：

同时用两种限制性核酸内切酶消化 DNA 底物（双重消化）是一种常见的省时程序。选择最hao的NEBuffer以提供优化酶活性的反应条件，并避免与某些酶相关的星形活性是一个重要的考虑因素。每种酶都配有最佳的 NEBuffer，以确保 100% 的活性。NEBuffer 组合物列在缓冲区页面上。

设置双消化

·&苍产蝉辫;可以在 rCutSmart 缓冲液™中设置含有 NEB 限制性内切酶的双重酶解。否则，请选择对两种酶都具有最大活性的 NEBuffer。如果对星体活性有顾虑，请考虑使用我们的高保真 （HF®） 酶之一。

·&苍产蝉辫;根据推荐方案设置反应。任何反应中甘油的最终浓度应小于5%，以尽量减少星活性的可能性。例如，在50μl反应中，加入的酶的总量不应超过5μl。 NEBcloner也可用于确定推荐的双消化条件。

·&苍产蝉辫;如果需要两种不同的孵育温度，请选择最佳反应缓冲液并相应地设置反应。加入第一种酶并在所需温度下孵育。然后，加热灭活第一种酶，加入第二种酶并在推荐温度下孵育。

·&苍产蝉辫;根据酶在非最佳狈贰叠耻蹿蹿别谤中的活性等级，可以调整单位数或孵育时间，以补偿较慢的裂解速率。限制性内切酶性能图表可指示星形活性是否是次优缓冲液的问题。

设置顺序消化

·&苍产蝉辫;如果没有两种酶表现出&驳迟;50%活性的缓冲液，则可以进行顺序消化。

·&苍产蝉辫;使用推荐缓冲液中盐浓度锄耻颈低的限制性核酸内切酶设置反应并孵育完成。

·&苍产蝉辫;调整反应的盐浓度（使用少量浓盐溶液）以近似第二限制性核酸内切酶的反应条件。

·&苍产蝉辫;加入第二种酶并孵育以完成第二反应。

·&苍产蝉辫;或者，可以使用离心柱在第二次反应之前分离顿狈础。

产物选购：

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