超滤离心管操作步骤一:准备工作
从4°颁冰箱中取出超滤管,使其恢复至室温(约15-30分钟),以防止冷膜在离心过程中破裂。
准备样品:确保样品已充分混匀,无大的不溶性颗粒物,以免堵塞膜孔。如有必要,可先进行离心或过滤预处理。
预冷离心机:将离心机预冷至4°颁(除非您的样品有特殊要求),以减少蛋白质变性和降解。
佩戴手套:操作全程佩戴手套,防止皮肤油脂污染膜或样品。
超滤离心管操作步骤二:预处理/润洗膜 (重要步骤!)
向样品室中加入适量预冷的超纯水或目的缓冲液(通常加至最大容量的一半以上)。
盖上盖子,在指定离心力下离心1-2分钟。
弃去滤出液。此步骤可以去除膜孔中的保护剂(如甘油),并激活膜孔,提高回收率和流速。
超滤离心管操作步骤叁:加入样品
将预处理的超滤管放入一个新的收集管中。
用移液器将样品加入样品室中。注意:不要超过最大标定体积,以免样品溢出污染滤膜外侧。
平衡:如果同时处理多个样品,务必在天平上用水配平至重量一致,以确保离心机平稳运行。
超滤离心管操作步骤四:离心浓缩
盖上盖子(如果盖子有功能孔,确保其畅通)。
根据说明书推荐的离心力(× g)和时间进行离心。切勿使用制动(brake)功能,以免产生的负压破坏膜结构。
起始离心条件参考:通常为2000-4000 × g,离心10-30分钟。具体条件需根据样品粘度、浓度和目标浓缩倍数进行调整。
离心后,检查滤出液的体积。如需进一步浓缩,可弃去滤出液,将样品室放回收集管中继续离心。
超滤离心管操作步骤五:样品回收
方法一(常规回收):离心完成后,小心地将超滤管倒扣在一个新的收集管上。以1000 × g 离心 1-2 分钟,即可将浓缩的样品回收至收集管中。
方法二(移液器回收):对于小体积样品,可用移液器小心地吹打膜表面多次,将粘附的浓缩样品吸下收集。注意:切勿用移液器jianduan触碰或刺破超滤膜!
超滤离心管操作步骤六:清洗与保存
立即用大量超纯水冲洗样品室和膜,防止样品残留干涸堵塞膜孔。
短期保存:可浸泡在超纯水或20%乙醇中,于4°颁存放。
长期保存:清洗后,干燥,室温避光保存。
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